ISO 15189 实验室认可之性能验证方案

ISO 15189 实验室认可之性能验证方案

为了满足目前医学实验室认可的需求，保证实验室检测结果的准确性，特制定实际可行方案。适用于定量项目的性能验证，包括肿瘤标志物、甲状腺激素、内分泌激素、免疫全套、心肌酶谱等。本方案从精密度、准确度、参考范围、临床可报告范围、线性范围以及携带污染6个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度

精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标，通常用不精密度表示。精密度验证包括重复性和中间精密度。

（1）重复性

方法:在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。计算批内精密度的CV值和SD值。

结果评价：按照国际（CLIA'88）推荐标准，批内不精密度≤1/4TEa。

（2）中间精密度

方法: 使用2个水平（Level 1、Level 2）的质控血清，每个水平各分装5管，每天各解冻1管上机重复测定3次，共测5天。如果质量控制程序或操作问题判定一批为失控，则增加一个分析批。

结果评价：按照国际（CLIA'88）推荐标准，批间不精密度≤1/3TEa。

2、 准确度

准确度指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。

方法: WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》中提出“可以利用测量不确定度来判断是否通过正确度验证”。本实验室通过测量不确定度的方法来验证正确度是否通过。

结果评价：参考CNAS-TRL-001：2012《医学实验室—测量不确定度的评定与表达》中的7.2.1.3 “利用精密度数据评定实验室内测量复现性引入的测量不确定度进行评定”。以至少6次PT结果数据作为评定测量不确定度的依据，从而得到一个具有足够可信限的与偏移相关的不确定度，采用的PT数据来源于国家卫健委临床检验中心的室间质评数据。通过计算得出扩展不确定度，扩展不确定度小于目标不确定度，则正确度验证通过。

3、 生物参考范围验证

依据卫生行业标准《WS/T 402-2012 临床实验室检验项目参考区间的制定》的规定，对厂家提供的或者实验室正在使用的各个项目的参考范围进行验证。

方法: 收集20例体检合格的健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，将这20例测定结果与参考区间比较，若落在参考区间外的测定值不超过2个，则参考区间可直接使用；否则需建立参考范围。

结果评价：不超过2例测定值在参考范围外。

4、 临床可报告范围验证

依据NCCLS EP6-A2文件的规定，对厂家提供的各个项目的可报告范围进行验证。

方法: 准备3个高值样本，每个高值样本重复测定3次，计算均值求得理论浓度、还原浓度，记录稀释倍数（参照说明书最大稀释倍数），计算稀释回收率（R，%）。

结果评价： 回收率在95%～105%可接受范围内，则验证该稀释倍数是可靠的。临床可报告范围（Clinical reportable range，CRR）=线性范围×最大稀释倍数。

5、 线性范围验证

依据NCCLS EP6-A2的规定，对厂家提供的各个项目的线性范围进行验证。

方法: 以试剂厂家提供的理论线性范围，收集相应的病人标本，使用纯化水按照一定比例混合（L，3L+1H，2L+2H，1L+3H，H；样本量较少时可使用倍比稀释），每个混合物重复检测3次取均值。

结果评价：将数据填入《线性评价》表格，以X表示各样品的预期值，以Y表示各样品的实测值，得出散点图。若所有实验点呈明显直线趋势，用直线回归对数据进行统计，得直线回归Y=bX+a，若r2>0.95斜率b在0.97～1.03范围内，可直接判断测定方法在实验所涉及的浓度范围内成线性。

6、 携带污染率验证

依据EP10-A2文件的规定，对厂家提供的各个项目的携带污染进行验证。

方法:选择高值和低值标本各一份，依次测高值标本3次（H1、H2、H3），低值标本3次（L1、L2、L3）,计算结果以公式携带污染率=∣（L1-L3）∣/∣(H3-L3)∣×100%计算。

结果评价：携带污染率<1.0%，验证通过。

7、 总结

性能验证是实验室中一项非常重要的工作，它涉及到实验室所使用的检测系统的性能是否符合生产厂家所宣称的要求，以及能否满足临床的需求。